Садржај
Анализа ланчане реакције полимеразе (ПЦР) је лабораторијска техника. Сврха ПЦР тестирања је да се пронађу мале количине ДНК у узорку, користећи поступак познат као појачање. Током ПЦР амплификације, ДНК од интереса се копира више пута док је нема довољно за анализу и детекцију. На пример, ПЦР се може користити за идентификовање малих количина ДНК из организама који узрокују гонореју или кламидију присутни у узорку урина.Како функционише ПЦР?
Први корак ПЦР-а је стварање прајмери. То су кратке секвенце ДНК које се подударају са крајевима узорка ДНК који покушавате да откријете. Они су трик у проналажењу, појачавању и откривању одређеног дела ДНК. Тај комад ДНК може се користити за идентификацију патогена. Такође се може користити за ствари попут откривања гена за резистенцију на антибиотике.
Једном када имате почетнице, следећи корак у ПЦР је загревање узорка тако да се дволанчана ДНК одвоји у две појединачне нити - ово се назива денатурација. Затим прајмерисе комбинују са узорком ДНК. После овога, ДНК полимераза користи се за започињање репликације ДНК на месту прајмера. На крају, ДНК се загрева да би се још једном раздвојиле нити. Тиме читав процес ПЦР почиње поново.
Количина ДНК сегмента од интереса који је присутан у узорку експоненцијално се повећава са сваким ПЦР циклусом. У првом циклусу једна копија постаје две. Затим две копије постају четири, а затим постају осам, итд. Овај експоненцијални раст значи да је генерално потребно само 20 до 40 циклуса да би се утврдило да ли је ДНК у питању. (Ако је ДНК присутна, 20-40 циклуса је такође довољно да се обезбеди довољан узорак за анализу).
Сви кораци ланчане реакције полимеразе - денатурирање ДНК, наношење прајмера и продужавање ДНК - дешавају се на различитим температурама. То значи да се након састављања почетне смеше кораци могу контролисати поступком познатим као термоциклирање. Термоциклирање значи да се температура одржава на потребном нивоу довољно дуго да се одржи сваки корак. Дакле, ПЦР је ефикасан начин појачавања количине циљне ДНК. У ствари, то се може постићи у једној епрувети са мало потребе за људском интервенцијом.
Ланчана реакција полимеразе представљала је револуцију у биолошкој техници када је први пут развијена раних 1980-их. Творац ПЦР-а, Кари Муллис, добио је Нобелову награду за хемију за свој рад 1993. године.
Зашто је ПЦР релевантан за тестирање СТД
Ланчана реакција полимеразе и сродне технике попут ланчана реакција лигазе, показују да имају све већи значај за тестирање сполно преносивих болести, јер ове технике могу директно идентификовати мале количине вирусне ДНК или РНК у узорцима. Идентификација генетског кода патогена не захтева да патоген буде жив, за разлику од бактеријске културе или вирусне културе. Такође не захтева да се инфекција догодила довољно дуго да би људи развили уочљиву реакцију антитела (начин на који инфекције открива ЕЛИСА.) То значи да ПЦР технике могу понекад открити болести раније од других тестова. Још боље, СТД се могу открити без потребе да се брине о одржавању узорака на животу или тестирању у тачно право време.
Најбољи тестови за полно преносиве болести код куће